坛子里的几位学医、学生物的朋友来解一个我的问题吧
今天上的课说一些限制性内切酶是从E.coli中提取，那么限制性内切酶应该存在细胞质中。E.coli没有核膜，这样酶应该可以和DNA接触。那么E.coli细胞质中的限制性内切酶为什么不会把E.coli的DNA切断？
3Q！
本帖是纯学术帖，谢绝[世界首穷]参与！
[ 本帖最后由 活动星图 于 2007-9-11 18:33 编辑 ] 是不是因为限制性内切酶都有专一性 E.coli里没有他识别的DNA序列？ 怎么会呢，碱基就那4个，出现可以切的序列还是很常见的吧？ 可是是特定的一段序列的呀~我学的现在就忘拉 哈哈 我学的是这样的
------A/A------
------T/T------ 某E能从2个A之间切成平末端，
或：
-C/G---------GC--
-GC---------C/G-- 这样切成粘性末端，这样的序列应该不难找吧？
[ 本帖最后由 活动星图 于 2007-9-11 17:39 编辑 ] 平末端和粘性末端没有错，但是，前面还要有必须的启动因子，就是一段启动序列，限制性内切酶才可以起作用 我觉得应该用酶的专一性和特异性来解释，只有两者都吻合了，才起作用的
哦 这样子
刚想起来叫粘性末端。。。::070821_05.jpg:: 高中知识忘的很快呀 引用: 挚爱镜子 在文中说道:平末端和粘性末端没有错，但是，前面还要有必须的启动因子，就是一段启动序列，限制性内切酶才可以起作用
能细讲讲吗::070821_21.jpg:: 引用: LAMOST 在文中说道:
刚想起来叫粘性末端。。。 高中知识忘的很快呀
你们高中就学了？我们才学。。。 原帖由 活动星图 于 2007-9-11 18:13 发表 http://www.astronomy.com.cn/bbs/images/common/back.gif
你们高中就学了？我们才学。。。
对呀 不过高中的那些全是最基础de 引用: yanciling 在文中说道:
我觉得应该用酶的专一性和特异性来解释，只有两者都吻合了，才起作用的
这话没错，但是上边也说了，要形成那样序列的概率也不应该很小。？ 双绞线不打开能剪么? 会不会把它打开的其它东西有关，刚好可以用来剪，又刚好负责识别? 单独一个酶要是能完成的话，那细胞里只要存在酶，就该把所有自己识别的地方都剪断了。看书已经忘了，我只是猜测酶应该只算整套工具中的一个，不是有完整功能独立运行的东西吧?
找到个简介，看来能单独运行，不过条件挺复杂啊，有切割的，也有修饰的，还有识别回文、理化环境......
http://www.bbioo.com/bio101/2006/7078.htm
[ 本帖最后由 千眼观音 于 2007-9-11 19:22 编辑 ] “会不会把它打开的其它东西有关”怎么理解？......
E.coli在复制时也要解旋吧，这时打开了，下边不是切进去了？。。。
我们上课时老师没说在切的时候要加别的酶，那篇文章我再好好看看。。。 限制性内切酶在细胞内表达水平极低，活力受到严格控制的，表达也受到控制，只有特定情况下才表达，比如真核细胞的细胞衰亡或DNA修复。
限制性内切酶的识别位点一般是6个碱基的回文结构，少数为8个或4个，一般情况下核酸是和蛋白质结合的，这样有保护作用，而且基因处于休眠状态的时候都是高折叠的螺旋状态，这种情况下内切酶是无法下口的。
内切酶的活性和启动子没有关系，那个是启动基因表达的开关。 学习了！！
回复 #14 活动星图 的帖子
基因复制的时候DNA虽然打开，但暴露的位置大多有蛋白占据了。 高中时老师说过DNA二级结构上核苷酸链将一个个蛋白质绕3又4分之3圈，是不是这个蛋白质刚好堵着酶切位点？记得上学期学免疫时讲过，一个补体（还是别的什么玩意）在被分泌前有蛋白质包裹某位点避免其他物质将它分解。大肠杆菌DNA的是不是也是这样？
我在baidu上搜到一些资料，说限制性内切酶能把外来入侵的DNA（那个文章举例的貌似是T4噬菌体DNA）切掉，难道T4 DNA没有蛋白质封住酶切位点吗？ 和DNA结合的是组蛋白和类组蛋白。外来核酸大多是游离的，当然没有蛋白质结合了。许多酶刚表达出来或分泌出来是没有活性的，需要激活，特别是蛋白酶。为什么生物死亡是不可逆的？其中一个原因是因为机体内的酶，特别是水解酶失控，造成自体破坏。 “高中时老师说过DNA二级结构上核苷酸链将一个个蛋白质绕3又4分之3圈，是不是这个蛋白质刚好堵着酶切位点？”
麻烦回一下这个问题 ::070821_21.jpg::
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