{新手}请教大家观察生物标本的问题

1.大家怎么制作生物切片？

我记得高中做临时装片的步骤是擦--滴--取--展--盖--染--吸 不知道是否正确

2.是不是观察生物标本都需要染色？
我只记得以前用过菲林试剂

3.涂片法是不是主要用于血液、精液、尿液、痰液、微生物的观察？

有介绍染色剂的高手请来个介绍

回复 2# yilongyang
这是高中用到的染色剂
1、斐林试剂
配制：1）甲液质量浓度为 0.1g/ml，取10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml
2）乙液质量浓度为0.05g/ml，取5gCuSO4溶于蒸馏水，稀释至100ml
临用时将甲、乙液等量混合
作用：鉴定还原性糖：C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等。
还原性糖与斐林试剂发生作用，生成砖红色沉淀。如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。

2、班氏尿糖定性试剂
配制 ：称取17.4克无水硫酸铜（CuSO4）溶解于100毫升热蒸馏水中，冷却后，稀释到150毫升。称取柠檬酸钠173克及无水碳酸钠（Na2CO3）100克，加蒸馏水600毫升，加热使之溶解，冷却后，稀释到850毫升。把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中，搅匀后即为班氏尿糖定性试剂。用细口瓶贮存备用（为了防止氢氧化铜沉淀的生成，故加入柠檬酸钠。柠檬酸钠是一种亲水性掩蔽性络合物形成剂，它能与铜离子形成可溶性络盐）。
使用方法同斐林试剂，所不同的是班氏试剂可长期使用。

3、双缩脲试剂
配制：A液：质量浓度为 0.1g/ml，取10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml
B液：质量浓度为0.01g/ml，取1gCuSO4溶于蒸馏水，稀释至100ml
使用时，先加A液，后加B液
作用：鉴定蛋白质，蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可产生紫色反应。也可用于鉴定多肽。

4、苏丹Ⅲ
配制：取0.1g苏丹Ⅲ，溶解在20ml95%酒精中
作用：鉴定脂肪，脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色）。

5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1：1）。
作用：用于洋葱根尖的解离，即使组织中的细胞相互分离开来。能杀死细胞固定。

6、质量浓度为0.01g/mL的或0.02g/mL龙胆紫溶液（或醋酸洋红溶液）
配制：是将龙胆紫溶解在质量分阶段数为2%的醋酸溶液中配制而成
作用：使细胞核内的染色体着色，便于观察。

7、质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液
作用：观察成熟植物细胞质分离时用。经此处理细胞仍具活性。

8、质量浓度为0.1mg/ml的亚甲基蓝溶液
配制：将亚甲基蓝溶于蒸馏水中配制而成
作用：（1）用于观察根对矿质元素离子的交换吸附观察；
（2）用于检测水中细菌情况，根据亚甲基蓝褪色情况，判断水质被细菌污染情况。
是活体染色剂。

9、丙酮
是有机溶剂，在叶绿体中色素提取时，用于溶解叶绿体中的色素。可用酒精替代，不过提取色素时将绿叶放入酒精中隔水加热

10、层析液
配制：由20份石油醚（在60~900C下分馏出来的）、2份丙酮和1份苯混合而成。是一种脂溶性很强的有机溶剂，叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同：溶解度高的随层析液在滤纸上扩散很快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。
代用品：93号汽油、四氯化碳

11、SiO2、CaCO3
加入少许SiO2是为了研磨得充分；加入少许CaCO3是为了防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。

12、碘液
配制：取2gKI ，溶解在5ml蒸馏水中，再加1gI，待溶解后用蒸馏水稀释至300ml。溶液在光亮处容易变成紫色，必须保存在暗色玻璃瓶里。
作用：用来测定淀粉，淀粉遇碘后，形成紫色的复合物。

13、二苯胺
配制：称取1.5g二苯胺，溶于100mL冰醋酸中，再加1.5mL浓硫酸，用棕色瓶保存。临用前，在10mL的上述溶液中再加入0.1mL体积分数为0.2%的乙醛溶液。
作用：DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色。

14、NaOH：用于吸收CO2（验证光合作用需要CO2）或改变溶液的pH,

15、Ca(OH)2：鉴定CO2（验证呼吸作用产生CO2）。

16、NaHCO3：提供CO2等。

谢谢，谢谢

什么情况？？？？。。。。。。

光显生物标本分切片、装片、涂片
切片是将待观察组织切成薄片后做成的标本
装片是直接取下待观察组织做成标本
涂片是各种液态分散系涂抹于载玻片上做成的标本
切片、装片基本步骤：
1.选择样本
2.切片或取样
（3-1.解离等预处理）
（3-2.漂洗）
（4.染色）
5.装片
涂片制作步骤：
1.取样
（2.预处理）
3.涂抹均匀
4.盖盖玻片

由于有的细胞的某些结构在光显下未经染色不易辨认出来，所以染色，但并不是说染色是必须的
常见非荧光染色剂：
1.台盼蓝：检验死细胞
2.0.2%考马斯亮蓝：细胞骨架
3.改良品红、碱性品红、醋酸龙胆紫、醋酸洋红等：染色体
4.健那绿：线粒体
5.氧化苏木精、甲基绿：细胞核
6.0.5%苏木精、4%铁矾等：胞间连丝
7.番红染液：染色导管
8.1%中性红：神经细胞尼氏小粒

9.酸性品红：结缔组织

解离是为了将大量团挤在一起的细胞离散开，并且改变细胞膜通透性，以便染色。最常用的解离液是0.5%HCl(aq)