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反射DIC口腔上皮细胞

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zxs19464 发表于 2013-1-3 22:09 | 显示全部楼层 |阅读模式 来自: 湖北省武汉市 电信

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    没想到反射DIC也能用在透射微分干涉观察,好激动。    第一张 olympus bhsp偏光显微镜+BH2-N-NIC附件+msplan 10x 物镜+NFK 3.3X 摄影物镜+模拟监控摄像头拍摄。
    第二张是 NPL FLUOTAR 50X物镜,其他一样。

    这意味着任何偏光显微镜加上落射DIC附件就能实现微分干涉观察。将诺曼斯基棱镜45度角插入起偏镜与检偏镜中间就成,物镜是假如消应力的话效果更好点,相信这两样相比原配生物DIC附件要好找。
   





50X

50X

10X

10X
slt2483 发表于 2013-1-3 22:26 | 显示全部楼层 来自: 辽宁省大连市 联通
幸福啊 在哪 搞到的反射DIC。。

点评

买一堆msplan物镜送的,品相不好,只能说能用。。。  详情 回复 发表于 2013-1-3 22:32
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 楼主| zxs19464 发表于 2013-1-3 22:32 | 显示全部楼层 来自: 湖北省武汉市 电信
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slt2483 发表于 2013-1-3 22:44 | 显示全部楼层 来自: 辽宁省大连市 联通
本帖最后由 slt2483 于 2013-1-3 22:45 编辑
zxs19464 发表于 2013-1-3 22:32
买一堆msplan物镜送的,品相不好,只能说能用。。。


买一堆msplan物镜送的在谁家买的   我去看看。。。
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dongmin 发表于 2013-1-3 23:00 来自手机 | 显示全部楼层 来自: 江苏省苏州市 电信
你确信这是透射DIC?      

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反射的,不过当投射用了。。。  详情 回复 发表于 2013-1-3 23:04
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 楼主| zxs19464 发表于 2013-1-3 23:04 来自手机 | 显示全部楼层 来自: 陕西省咸阳市 腾讯公司电信数据中心
dongmin 发表于 2013-1-3 23:00
你确信这是透射DIC?

反射的,不过当投射用了。。。
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 楼主| zxs19464 发表于 2013-1-3 23:06 来自手机 | 显示全部楼层 来自: 陕西省咸阳市 腾讯公司电信数据中心
反射的,跟您安在江南偏光的那种差不多。。不过当透射用还可以。。
基本上偏光镜离DIC就一部之遥了。。

点评

我猜想你的聚光镜孔径光阑开得很小,这样入射光是部分相干的,和plasDIC一个原理。 plasDIC是在聚光镜使用一个条状的孔径光阑(光阑的方向和棱镜光轴夹角有要求),你也可以试试,效果应该更好。  详情 回复 发表于 2013-1-4 08:35
常规透射DIC的话,聚光镜下还要有对应的一个DIC棱镜。 不过你说的这个组合(偏光加物镜后DIC棱镜),的确也可以有DIC效果,和zeiss的plasDIC的原理类似。 Comparison of Smith/Nomarski DIC and PlasDIC  详情 回复 发表于 2013-1-4 08:31
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slt2483 发表于 2013-1-4 08:04 | 显示全部楼层 来自: 辽宁省大连市 联通
立体感 很强。。。等玩够了, 转给我体验一下  哈哈。。。
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461925607qq 发表于 2013-1-4 08:30 | 显示全部楼层 来自: 河南省新乡市 移动
DIC什么意思?第一次见还以为是弥散性血管内凝血呢
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dongmin 发表于 2013-1-4 08:31 | 显示全部楼层 来自: 江苏省苏州市 电信
zxs19464 发表于 2013-1-3 23:06
反射的,跟您安在江南偏光的那种差不多。。不过当透射用还可以。。
基本上偏光镜离DIC就一部之遥了。。 ...

常规透射DIC的话,聚光镜下还要有对应的一个DIC棱镜。
不过你说的这个组合(偏光加物镜后DIC棱镜),的确也可以有DIC效果,和zeiss的plasDIC的原理类似。

DIC.vsPlasDIC.jpg
[size=-1]Comparison of Smith/Nomarski DIC and PlasDIC




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dongmin 发表于 2013-1-4 08:35 | 显示全部楼层 来自: 江苏省苏州市 电信
zxs19464 发表于 2013-1-3 23:06
反射的,跟您安在江南偏光的那种差不多。。不过当透射用还可以。。
基本上偏光镜离DIC就一部之遥了。。 ...

我猜想你的聚光镜孔径光阑开得很小,这样入射光是部分相干的,和plasDIC一个原理。
plasDIC是在聚光镜下使用一个条状的孔径光阑(光阑的方向和棱镜光轴夹角有要求),你也可以试试,效果应该更好。

点评

确实! 当时拍的时候只能将孔径光栅开到NA=0.2左右,否则背景太亮了就啥都看不到。。当时看Zeiss官网上也觉得DIC还分为很多种很复杂,现在有种感觉完全是换汤不换药,不知道专业观察者对不同种类DIC有什么看法。 其  详情 回复 发表于 2013-1-4 11:57
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 楼主| zxs19464 发表于 2013-1-4 11:57 | 显示全部楼层 来自: 美国 Google全球边缘网络
dongmin 发表于 2013-1-4 08:35
我猜想你的聚光镜孔径光阑开得很小,这样入射光是部分相干的,和plasDIC一个原理。
plasDIC是在聚光镜下使 ...

确实! 当时拍的时候只能将孔径光栅开到NA=0.2左右,否则背景太亮了就啥都看不到。。当时看Zeiss官网上也觉得DIC还分为很多种很复杂,现在有种感觉完全是换汤不换药,不知道专业观察者对不同种类DIC有什么看法。
其实看olympus 80年代显微镜资料时觉得透射DIC和反射DIC光路设计有点不一样,后来看了反射偏光显微镜的光路结构发觉和透射偏光的原理基本上相同,无外乎是光从起偏镜出来照在待检样品上产生光程差然后通过检偏镜产生干涉色,所以就想到用反射DIC看透明标本,无外乎是DIC棱镜在其中起了怎样的作用罢了。
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dongmin 发表于 2013-1-4 16:40 | 显示全部楼层 来自: 江苏省苏州市 电信
反射式的因为照明的入射光和成像的反射光共用一个DIC棱镜,所以用一个就可以了。
透射式的一般要两个棱镜配合用。
Zeiss的所谓plasDIC用一个狭缝获得相干光照明,可以省掉照明部分的DIC棱镜,也能获得不错的立体效果。缺点是分辨率差些,优点是照明光可以不用偏振光,这样对双折射材料的样品(比如塑料器皿)也能用。

当然,像你那样把起偏器放到入射光一端效果也是一样的。

点评

多谢doming兄指点,现在感觉得弄一个能产生相干光的东西夹在聚光镜下面,毕竟假如单纯把孔径光栅开小严重影响高倍物镜亮度,自己那台BHS本来电源只能调到8V的样子(自己弄过两台BHS架子,学校有台BHS,这三台都是这  详情 回复 发表于 2013-1-4 20:32
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 楼主| zxs19464 发表于 2013-1-4 20:32 | 显示全部楼层 来自: 湖北省武汉市 电信
本帖最后由 zxs19464 于 2013-1-4 20:35 编辑
dongmin 发表于 2013-1-4 16:40
反射式的因为照明的入射光和成像的反射光共用一个DIC棱镜,所以用一个就可以了。
透射式的一般要两个棱镜配 ...

多谢doming兄指点,现在感觉得弄一个能产生相干光的东西夹在聚光镜下面,毕竟假如单纯把孔径光栅开小严重影响高倍物镜亮度,自己那台BHS本来电源只能调到8V的样子(自己弄过两台BHS架子,学校有台BHS,这三台都是这个毛病,不知道怎么搞的),再加上起偏镜检偏镜会损失8成以上的光强。所以上100X物镜时候基本上想得到好点的微分干涉效果都得把聚光镜NA调到最低,结果就完全看不清了。
Zeiss的plasDIC设计是用看起来很简单的一个光栅就搞定了,这玩意怎么DIY呢?杨氏双缝干涉实验用的东西能直接车一个安到光源上面吗?
还有就是BHS是柯勒照明,从光源里面出来的是平行光,不知道有啥办法。
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dongmin 发表于 2013-1-5 07:54 来自手机 | 显示全部楼层 来自: 江苏省无锡市 电信IDC机房
本帖最后由 dongmin 于 2013-1-5 07:59 编辑

狭缝一般装在聚光镜的光圈位置,原来的光圈开最大。取下目镜或者使用偏光镜的锥光观察,可以看到狭缝的像。
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dongmin 发表于 2013-1-5 11:55 | 显示全部楼层 来自: 江苏省苏州市 电信
本帖最后由 dongmin 于 2013-1-5 11:56 编辑

你用厚纸剪一个狭缝,直接放在BH2的偏光聚光镜摇出式透镜下面的平玻璃上试试看,可能可以。
可以用贝氏镜观察,调中狭缝的位置和(相对于干涉纹的)角度。祝你好运,呵呵

另外偏光物镜塔上调整物镜的专用工具是不是可以用个通用螺丝刀代替?找好合适的型号就可以了。

点评

问下 这个狭缝多宽 和长 ,是放在 聚光镜上?和摇出式中间吗。。。 同时减偏和起偏都有?是正常的偏光方式 安装一个狭缝就有 DIC的效果?  详情 回复 发表于 2013-1-5 23:24
刚刚是把狭缝安在聚光镜底下,不过没太大改进,估计要得到好的效果得拆聚光镜了。另外BHSP物镜塔及载物台调中用普通改锥就成。 但是自己还有台zeiss小灰偏光,物镜塔能对中工具类似于江南单目偏光,但是又要小一号,  详情 回复 发表于 2013-1-5 15:02
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 楼主| zxs19464 发表于 2013-1-5 15:02 | 显示全部楼层 来自: 湖北省武汉市 电信
本帖最后由 zxs19464 于 2013-1-5 15:03 编辑
dongmin 发表于 2013-1-5 11:55
你用厚纸剪一个狭缝,直接放在BH2的偏光聚光镜摇出式透镜下面的平玻璃上试试看,可能可以。
可以用贝氏镜观 ...

刚刚是把狭缝安在聚光镜底下,不过没太大改进,估计要得到好的效果得拆聚光镜了,安在聚光镜下面这种方法晚上试一下。另外BHSP物镜塔及载物台调中用普通改锥就成。
但是自己还有台zeiss小灰偏光,物镜塔能对中工具类似于江南单目偏光,但是又要小一号,不知道该怎么办了。

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slt2483 发表于 2013-1-5 23:24 | 显示全部楼层 来自: 辽宁省大连市 联通
dongmin 发表于 2013-1-5 11:55
你用厚纸剪一个狭缝,直接放在BH2的偏光聚光镜摇出式透镜下面的平玻璃上试试看,可能可以。
可以用贝氏镜观 ...

问下 这个狭缝多宽 和长  ,是放在 聚光镜上?和摇出式中间吗。。。  同时减偏和起偏都有?是正常的偏光方式 安装一个狭缝就有 DIC的效果?

点评

1. 狭缝长度尽量长,在长度方向相当于光圈全开 2. 狭缝宽度和物镜倍数有关。在正交偏光条件下,插入DIC棱镜,用贝氏镜观看物镜后焦面,可以看到干涉条纹。狭缝的宽度不要超过干涉条纹间距的1/4. 太宽了没有对比度,  详情 回复 发表于 2013-1-6 08:58
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dongmin 发表于 2013-1-6 08:58 | 显示全部楼层 来自: 江苏省苏州市 电信
slt2483 发表于 2013-1-5 23:24
问下 这个狭缝多宽 和长  ,是放在 聚光镜上?和摇出式中间吗。。。  同时减偏和起偏都有?是正常的偏光 ...

1. 狭缝长度尽量长,在长度方向相当于光圈全开
2. 狭缝宽度和物镜倍数有关。在正交偏光条件下,插入DIC棱镜,用贝氏镜观看物镜后焦面,可以看到干涉条纹。狭缝的宽度不要超过干涉条纹间距的1/4. 太宽了没有对比度,太窄了亮度不够。
3. 狭缝的理想位置是在聚光镜的前焦面,就是孔径光圈的地方。如果是摇出式的,一般孔径光圈在内部不好改动,可以放在摇出头的下面那个平玻璃上。
4. 你需要把显微镜调整到正交偏光,物镜后要有DIC棱镜,狭缝和棱镜的方向也需要调整。。。

具体的原理可以看Zeiss的这篇文章:
http://www.zeiss.com/C1256F8500454979/0/366354E1E8BA8703C1256F8E003BBCB9/$file/plasdic_photonik_2004march_e.pdf

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感谢 。。我想试试 偏光基础上 加个狭缝试试看 有没有效果 哈哈  详情 回复 发表于 2013-1-6 10:13
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slt2483 发表于 2013-1-6 10:13 | 显示全部楼层 来自: 辽宁省大连市 联通
dongmin 发表于 2013-1-6 08:58
1. 狭缝长度尽量长,在长度方向相当于光圈全开
2. 狭缝宽度和物镜倍数有关。在正交偏光条件下,插入DIC棱 ...

感谢 。。我想试试  偏光基础上 加个狭缝试试看  有没有效果 哈哈

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估计起码得要一个DIC棱镜。。。  详情 回复 发表于 2013-1-6 18:26
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