胡杨武 发表于 2011-7-9 09:41

为什么我们生物实验室的显微镜看不到啊?不给力,我们同学都说欺骗我们感情

slt2483 发表于 2011-7-9 10:09

本帖最后由 slt2483 于 2011-7-9 10:11 编辑

不是成品标本, 就是鱼缸里的水滴在载玻片上,盖上盖玻片观察.
标尺是在photoshop里做的,根据物镜和摄影目 ...
dongmin 发表于 2011-7-9 09:34 http://www.astronomy.com.cn/bbs/images/common/back.gif


    具体怎么测算 和操作能详解一下吗(我的是1倍摄影目镜 40D相机) 谢谢

dongmin 发表于 2011-7-9 10:21

本帖最后由 dongmin 于 2011-7-9 10:34 编辑

具体怎么测算 和操作能详解一下吗(我的是1倍目镜 40D相机) 谢谢
slt2483 发表于 2011-7-9 10:09 http://www.astronomy.com.cn/bbs/images/common/back.gif

是这样的:
我用的相机是佳能EOS450D,每个像素5.2微米,所有图像我都先缩小到1/4了,就是图上的每个像素是20.8微米。
我用的100倍物镜,3.3倍摄影目镜,总放大倍数330倍。这样图上每个像素对应63纳米,10微米的标尺需要158个像素(见帖子中100%的原图)。
在photoshop中打开图像,100%放大率下,画一个长158个像素的直线就可以了。

你的情况要根据40D的像素大小和显微镜物镜倍率来计算,关键是显微镜的总放大倍率估算要准确。

slt2483 发表于 2011-7-9 10:46

是这样的:
我用的相机是佳能EOS450D,每个像素5.2微米,所有图像我都先缩小到1/4了,就是图上的每个像素 ...
dongmin 发表于 2011-7-9 10:21 http://www.astronomy.com.cn/bbs/images/common/back.gif


    有些明白了 呵呵 感谢

一丈法师 发表于 2011-7-9 14:08

本帖最后由 一丈法师 于 2011-7-9 14:15 编辑

还是买个显微镜专用测微台尺吧,便宜的几十元。用不同倍数的物镜分别拍照,再用photoshop的测量工具测量和换算,并在PS的“分析工具”中设定好不同倍数物镜的测量比例,直接、简单而且靠谱。

zystarry 发表于 2011-7-9 18:55

最后一个是什么花粉?

dongmin 发表于 2011-7-10 12:21

还是买个显微镜专用测微台尺吧,便宜的几十元。用不同倍数的物镜分别拍照,再用photoshop的测量工具测量和 ...
一丈法师 发表于 2011-7-9 14:08 http://www.astronomy.com.cn/bbs/images/common/back.gif

谢谢你的建议。

dongmin 发表于 2011-7-10 12:27

最后一个是什么花粉?
zystarry 发表于 2011-7-9 18:55 http://www.astronomy.com.cn/bbs/images/common/back.gif

非常抱歉,不知道是什么植物的花粉。标本上没有标明。

killj 发表于 2011-7-10 13:57

dongmin 发表于 2011-7-13 14:18

回去试了下100倍的透射暗场,反差比斜入射大很多,立体感也很强。但是分辨率未必比斜入射高,因为手头的暗场聚光镜要求物镜NA<1(好像还没有听说有适用NA>1的物镜的暗场聚光镜),只能把物镜上的孔径光圈调小了。
而斜入射在特定方向的分辨甚至能超过一般的明场照明。

dongmin 发表于 2011-7-19 13:52

很有立体感啊,不过个人更喜欢暗视野
killj 发表于 2011-7-10 13:57 http://www.astronomy.com.cn/bbs/images/common/back.gif

100x物镜,暗视野照明。小DC目镜后拍摄。
和前面同样的藻类,放大倍数无法估算。
   

dongmin 发表于 2011-7-21 20:10

才发现暗场聚光镜的调中机制失灵了, 油脂腻住了,这好像是某个牌子显微镜的通病了.
上面那张暗场的照明是偏的.
今天把它拆开清洗了一下,修好了.下面这张效果好些. DC在目镜后手持拍的,难免有些抖动。

digger2011 发表于 2011-7-22 09:56

回复 32# dongmin


    请问你的倾斜照明是用台灯还是什么光源?觉得暗视场拍摄出的边缘不好识别,倾斜照明的拍摄效果很不错。

dongmin 发表于 2011-7-22 11:05

倾斜照明(Oblique Illumination)是透射显微的一种照明方法。是在聚光器的孔径光圈位置附近加一个阻挡片,挡住部分角度的入射光得到的。如下图



常用的阻挡片,我用的类似(c)


不同透射照明方法的空间频率传递函数(MTF)曲线:
曲线1是普通的透射照明
曲线3是倾斜照明,可以看到高频部分的传递函数明显增加,分辨率是最高的。

ecms 发表于 2011-7-28 19:42

这个也没看过。。谢谢法图
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查看完整版本: 倾斜照明(13楼加入了100倍物镜的图像)